OTIMIZAÇÃO DA REAÇÃO DE LIPASES EM SUBSTRATO ALTERNATIVO

Autor(es): Larissa Pereira Machado , Larissa Fernanda Finazzi da Costa, Virginia Tamiosso, Sabrina Carra,
Orientador: Eloane Malvessi
Quantidade de visulizações: 130

Otimização da reação de lipases em substrato alternativo
As lipases são enzimas que podem ser aplicadas em diversos segmentos industriais, tais como energético, alimentício, têxtil, farmacêutico, produtos de limpeza e em tratamento de resíduos. Contudo, a eficácia da reação catalisada por lipases está intrinsecamente ligada à especificidade do substrato e das condições reacionais, o que pode interferir no rendimento da reação catalisada. Neste sentido, o objetivo desse trabalho foi avaliar a ação de lipases de Aspergillus niger LB-02-SF, empregando óleo de soja como substrato. Foi conduzido cultivo para a produção de lipases em agitador de bancada, a 250 rpm, a 30ºC, por 96 horas. As lipases extracelulares foram obtidas por centrifugação (2000 xg por 15 min) e, posteriormente, utilizadas na otimização das condições de catálise. Para o ensaio de otimização, foi feito um delineamento composto central (DCC) com a avaliação das condições de temperatura de 28 a 36ºC, agitação entre 60 e 180 rpm, pH 6,0 a 8,0, concentração de óleo de soja entre 1 e 5% (m/v) e tempo de 30 a 180 minutos. O experimento seguiu uma matriz com cinco variáveis e três repetições do ponto central, com cada condição avaliada em triplicata, totalizando 57 testes. A atividade lipolítica foi avaliada por titulação de ácidos graxos liberados na reação catalisada, com a adição de quantidade de substrato e pH ajustado com 2 mL de solução tampão fosfato de sódio (0,1 mol.L-1), predefinidos para cada teste, e 10 mL de extrato bruto. As reações foram encerradas pela adição de 5 mL de uma solução de inibição composta por acetona, etanol e água (1:1:1). Como resultados dos testes de otimização, as atividades lipolíticas variaram de 0,27 a 16,60 U.mL-1 e entre os parâmetros que apresentam maior influência significativa destacam-se pH, seguido do tempo e agitação. As condições que resultaram na maior atividade lipolítica foram 28ºC, pH 6,0, 300 rpm, 180 minutos e 5,0% (m/v) de substrato, a qual foi validada experimentalmente. Por fim, esses resultados indicam a importância do controle de parâmetros da reação de lipases, dependendo do substrato utilizado, para favorecer a eficiência catalítica durante a sua aplicação.

Palavras-chave: lipases, atividade catalítica, otimização