Potencial antifúngico da natamicina sobre leveduras

Autor(es): Luiza Pellini Danelus , Fernando Joel Scariot, Sérgio Echeverrigaray Laguna,
Orientador: Ana Paula Longaray Delamare
Quantidade de visulizações: 312

A natamicina é um composto do grupo dos polienos antimicóticos e possui um amplo potencial antifúngico. Ela é utilizada estritamente como bioconservador de queijos no Brasil, e em outros países para tratamento tópico em animais, afecções oculares em humanos e tratamento da leishmaniose. Assim sendo, o potencial antifúngico da natamicina poderia ser ampliado para fármacos na indústria veterinária entre outras. O objetivo deste trabalho foi avaliar a concentração inibitória mínima e letal de natamicina sobre várias leveduras, testar o efeito da presença de ergosterol e estudar o modo de ação do composto. Primeiramente foi determinada a concentração inibitória de natamicina em doses de 0 a 50 mg/L sobre as leveduras Candida albicans, C. glabrata, C. krusei, C. tropicalis e Saccharomyces cerevisiae. Os tratamentos nos quais não foi observado crescimento foram inoculados em placa YEPD a fim de avaliar a concentração fungicida mínima. Posteriormente, realizou-se testes de viabilidade com S. cerevisiae nas concentrações de 0 a 16 mg/L de natamicina em meio YNB com e sem ergosterol por 24 h e avaliados por spot assay (0; 3; 6; 24 h). A avaliação da mortalidade das células foi realizada por citometria de fluxo com marcadores PI/CDFA e a presença de espécies reativas de oxigênio por DCFH. Verificou-se que o crescimento de todas as leveduras foi inibido entre as concentrações 1,56 e 6,25 mg/L do antibiótico testado, mostrando que as CIMs foram 2,6 mg/L para S. cerevisiae, 2,4 mg/L para C. glabrata, 3,7 mg/L para C. tropicalis, 3,3 mg/L para C. krusei, e 5 mg/L para C. albicans. Já as CFMs variaram ente 3, 5 e 8 mg/L. Nos testes de viabilidade observou-se eficaz inibição do crescimento independentemente da adição de ergosterol. Entretanto, a avaliação por citometria de fluxo mostrou que o ergosterol preservou a integridade da membrana celular em células tratadas com natamicina. A citometria evidenciou um efeito dose dependente das leveduras à natamicina, e morte por perda de integridade da membrana e atividade metabólica. Observou-se que os tratamentos com natamicina aumentaram a concentração intracelular de ROS. Sendo assim, pode-se concluir que a natamicina é um antibiótico promissor com relação às leveduras e com base nisso deve ser estudado seu modo de ação e as variações entre espécies de leveduras.

Palavras-chave: Natamicina, Leveduras, Antimicótico