Comparação de cultivo celular 2D versus 3D da linhagem tumoral Hep-2 tratada com Biochanina A

Autor(es): Bianca Viecelli Bertassi , Caroline Olivieri da Silva Frozza, Fernando Joel Scariot, Sergio Echeverrigaray,
Orientador: Mariana Roesch Ely
Quantidade de visulizações: 362

A Biochanina A é uma isoflavona encontrada principalmente no trevo vermelho com baixa solubilidade e absorção oral que é conhecida por ter vários efeitos, incluindo atividade anti-inflamatória, semelhante ao estrogênio e atividade moduladora do metabolismo da glicose e lipídios, bem como preventiva do câncer, efeitos neuro protetores e de interação medicamentosa. Em vista disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da Biochanina-A em células humanas de carcinoma epidermoide de laringe (Hep-2) e comparar os resultados quando realizado o cultivo bidimensional versus o tridimensional. Para tanto, a linhagem celular foi tratada com diferentes concentrações de Biochanina-A (5 –15 –25 –35 –50 –75 µg/mL) pelo período de 72 horas. A viabilidade celular no modelo bidimensional foi avaliada pela capacidade de redução do [3-(4,5-dimetiltiazol 2-il)-2,5 difenil brometo de tetrazolina] com posterior leitura no espectrofotômetro a 570 nm. O cultivo celular 3D foi realizado utilizando-se a linhagem celular tumoral Hep-2 e o molde MicroTissues® 3D Petri Dish® micro-mold spheroids. Plaqueou-se um inóculo de 2 x 10⁶ células por molde, totalizando, após 3 dias de crescimento, 81 esferoides. Foi utilizado o corante 7-amino-actinomicina D (7-AAD) para a exclusão de células não viáveis utilizando a citometria de fluxo com o software FlowJo. Nossos resultados mostraram que a Biochanina-A foi citotóxica para as células Hep-2 (IC50 = 30,22 ?g/mL), inibindo o crescimento das células e foi possível a comparação entre os modelos bidimensional e tridimensional, uma vez que a viabilidade celular é caracterizada pela marcação com 7-AAD, sendo que, as células viáveis são as que não possuem esta marcação (7AAD-). Embora outros estudos sejam necessários, estes relatos abrem novas perspectivas para estudos visando o desenvolvimento de substâncias com poder farmacológico na terapia contra o câncer.

Palavras-chave: Biochanina-A, Câncer, Cultivo tridimensional